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一种保肝药物组合物

发明公布  在审
申请(专利)号:CN201811541541.X国省代码:天津 12
申请(专利权)人:天津中医药大学
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摘要:
本发明公开了一种保肝药物组合物,活性成分为间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛三种小分子酚酸,所述间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛摩尔比例为1.5~4:0.5~1.5:0.8~1.5。本发明的药物组合物可显著改善D‑GalN引起的HepG2细胞的死亡,提高细胞存活率,改善由于D‑GalN引起的血清ALT和AST的活力的升高,可显著显示出预防和治疗肝损伤的活性。

主权项:
1.一种保肝药物组合物,其特征在于,活性成分为间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛三种小分子酚酸,所述间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛摩尔比例为1.5~4:0.5~1.5:0.8~1.5。


说明书

一种保肝药物组合物

技术领域

本发明涉及药学领域,具体涉及一种保肝药物组合物。

背景技术

野菊花为菊科多年生草本植物,性微寒,具有疏散风热、消肿解毒、清肝明目的功
效。蒙花苷是中药野菊花的主要活性成分,现代药理学研究表明蒙花苷可以有效的预防和
治疗化学性肝损伤(Kim,S.J.;et al.Protective effect of linarin against D-
galactosamine and lipopolysaccharide-induced fulminant hepatic failure.Eur J
Pharmacol.2014;738:66-73.)。但是,蒙花苷具有口服吸收差,体内代谢广泛,生物利用度
低等药代动力学特征(Feng,X.C.;et al.A rapid and sensitive LC-MS/MS method for
the determination of linarin in small-volume rat plasma and tissue samples
and its application to pharmacokinetic and tissue distribution study.Biomed
Chromatogr.2016(4):618-24.)。因此,深入探究蒙花苷的体内代谢情况,寻找活性代谢产
物,将有助于开发获得保肝功效更好的候选药物。本发明涉及的三种小分子酚酸均是在蒙
花苷体内代谢研究中获得的代谢产物(Feng,X.C.;et al.Characterization of the In
Vivo and In Vitro Metabolites of Linarin in Rat Biosamples and Intestinal
Flora Using Ultra-High Performance Liquid Chromatography Coupled with
Quadrupole Time-of-Flight Tandem Mass Spectrometry.Molecules.2018;23(9).pii:
E2140.),经过现代药理试验研究,确定了由这三个小分子酚酸组成的药物组合物具有良好
的预防和治疗肝损伤的活性。

发明内容

为了解决现有技术中的问题,本发明提供一种保肝药物组合物,解决现有技术中
野菊花中保肝活性成分口服吸收差,体内代谢广泛,生物利用度低等问题。

本发明的技术方案是:

一种保肝药物组合物,活性成分为间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛三种
小分子酚酸,所述间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛摩尔比例为1.5~4:0.5~1.5:
0.8~1.5;三者化学结构式如下:


所述间苯三酚、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲醛摩尔比例为2:1:1。

加入药学可接受的辅料按常规方法制成固体或液体制剂。

所述液体制剂溶剂为:N,N-二甲基甲酰胺:1,2丙二醇:0.5%羧甲基纤维素钠:聚
乙二醇400=3:3:4:10。

所述保肝药物组合物在制备预防和治疗急性肝损伤药物的用途。

本发明的有益效果是:所述的药物组合物在体外细胞实验和整体动物实验中均表
现出较强的预防和治疗肝损伤的作用,该药物组合物可用于预防和治疗急性肝损伤。此外,
所述的药物组合物结构简单,易于获得,价格便宜,易于制成各类固体或液体制剂。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行描述,所描述的实施例仅仅是本
发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在
没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

本发明所用原料均采用市售材料。

实施例1

按照下述方法制备该药物组合物溶液:采用DMSO做溶剂,三种酚酸的含量分别为:
间苯三酚(I)5mmol/L,对羟基苯甲酸(II)2.5mmol/L,对羟基苯甲醛(III)2.5mmol/L。

实施例2

按照下述方法制备该药物组合物溶液:采用DMSO做溶剂,三种酚酸的含量分别为:
间苯三酚(I)10mmol/L,对羟基苯甲酸(II)3.75mmol/L,对羟基苯甲醛(III)3.75mmol/L。

实施例3

按照下述方法制备该药物组合物溶液:采用DMSO做溶剂,三种酚酸的含量分别为:
间苯三酚(I)3.75mmol/L,对羟基苯甲酸(II)1.25mmol/L,对羟基苯甲醛(III)2mmol/L。

实施例4

按照下述方法制备该药物组合物溶液。按照如下比例配制的混合溶液,N,N-二甲
基甲酰胺:1,2丙二醇:0.5%羧甲基纤维素钠:聚乙二醇400=3:3:4:10。采用上述溶液作为
溶剂配制该药物组合物,三种酚酸的含量分别为:间苯三酚(I)2mmol/L,对羟基苯甲酸(II)
1mmol/L,对羟基苯甲醛(III)1mmol/L。

实施例5

按照下述方法制备该药物组合物溶液:按照如下比例配制的混合溶剂,N,N-二甲
基甲酰胺:1,2丙二醇:0.5%羧甲基纤维素钠:聚乙二醇400=3:3:4:10。采用上述溶液作为
溶剂配制该药物组合物,三种酚酸的含量分别为:间苯三酚(I)1.5mmol/L,对羟基苯甲酸
(II)0.5mmol/L,对羟基苯甲醛(III)0.8mmol/L。

实施例6

按照下述方法制备该药物组合物溶液:按照如下比例配制的混合溶剂,N,N-二甲
基甲酰胺:1,2丙二醇:0.5%羧甲基纤维素钠:聚乙二醇400=3:3:4:10。采用上述溶液作为
溶剂配制该药物组合物,三种酚酸的含量分别为:间苯三酚(I)4mmol/L,对羟基苯甲酸(II)
1.5mmol/L,对羟基苯甲醛(III)1.5mmol/L。

药理实验

实验例1

该药物组合物对D-氨基半乳糖(D-GalN)造成的HepG2细胞损伤的保护作用测试

取处于对数生长期的HepG2细胞(ATCC),加入含有10%胎牛血清的DMEM培养基(含
100U/mL青霉素和100mg/mL链霉素)调节细胞浓度1.2×105cell/mL的密度,接种于96孔板
中,接种体积为100μL,放入控温37℃的5%CO2培养箱培养24h。设置正常组、肝损伤组和药
物保护组,每组设置3个复孔。正常组和肝损伤组去除上层培养基,加入50μL新鲜培养基;药
物保护组去除上层培养基,加入50μL含0.5μL不同比例该药物组合物的培养基;各组细胞均
放入控温37℃的5%CO2培养箱培养,培养1h后,肝损伤组和药物组合组分别加入含有D-
GalN(65mmol/L)的培养基50μL,造成HepG2细胞的损伤;正常组加入新鲜培养基50μL。继续
培养24h,去除上层培养基后,每孔加入100μL浓度为5mg/mL的MTT,继续放入控温37℃的5%
CO2培养箱培养2.5h。随后弃去96孔板中含药的培养基,每孔加入150μL DMSO,振荡10min使
甲瓒完全溶解,随后使用酶标仪在490nm波长下测定吸光度值,正常组的吸光度值记为
A490,control,肝损伤组和该药物组合物组的吸光度值记为A490,sample。按照以下公式计
算细胞存活率:

Cell viability(%)=[A490,sample/A490,control]·100%

表1该药物组合物对D-GalN造成的HepG2细胞损伤的保护作用结果


上述实验结果显示,D-GalN可引起HepG2细胞的大量死亡,显著降低HepG2细胞的
存活率。本发明的药物组合物可显著改善D-GalN引起的HepG2细胞的死亡,提供细胞存活
率,该药物组合物可有效预防并治疗急性肝损伤。

实验例2

该药物组合物对D-氨基半乳糖(D-GalN)造成的大鼠肝损伤的保护作用

取健康雄性SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、药物组合物组和阳性对照组,
每组8只。阳性对照药水飞蓟素和该药物组合物均以溶液剂形式给药。溶液剂溶剂为N,N-二
甲基甲酰胺:1,2丙二醇:0.5%羧甲基纤维素钠:聚乙二醇400=3:3:4:10。正常组和模型组
大鼠连续灌胃给予上述溶剂7天,每天给药1次,每次给药体积为1mL。药物组合物组大鼠连
续灌胃给予不同比例的该药物组合物7天,给药剂量为10mL/kg。阳性药组连续灌胃给予水
飞蓟7天,给药剂量为100mg/kg。模型组、药物组合物组和阳性药物组均在末次给药2h后腹
腔注射D-GalN(600mg/kg)造成肝损伤模型。各组在造模后24h眼眶取血,静置3小时获得血
清,采用试剂盒测定各组谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活力。

表2各组大鼠血清中ALT和AST活力


图1
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