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一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法

发明公布  有效
申请(专利)号:CN201505030523.X国省代码:河南 41
申请(专利权)人:河南省农业科学院烟草研究所
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摘要:
本发明涉及一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法,包括以下步骤:第一步,木霉菌一级菌种的培养:用PDA培养基进行木霉菌一级菌种的培养;第二步,木霉菌二级菌种的培养:采用麦粒培养基,灭菌后接种木霉菌一级菌种,在28℃,空气湿度为65%的环境下,培养15‑20天,作为木霉菌二级菌种;第三步,木霉菌三级菌种的制备:取第一培养料,高温杀菌冷却后,加入2‑3%木霉菌二级菌种,然后在发酵室26‑30℃下发酵10‑15天,制成木霉菌三级菌种;第四步,木霉菌菌肥制备:取第二培养料,堆置发酵7‑15天后,将第二培养料散开自然散热,待料温度降到25‑30℃时,加入木霉菌三级菌种混匀后常温发酵,堆温度控制在26‑30℃,湿度控制在60%‑65%,每3天翻料一次,发酵10‑15天后即获得木霉菌菌肥。

主权项:
1.一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法,其特征在于,包括以下步骤:第一步,木霉菌一级菌种的培养:用PDA培养基进行木霉菌一级菌种的培养;第二步,木霉菌二级菌种的培养:采用麦粒培养基,灭菌后接种木霉菌一级菌种,在28℃,空气湿度为65%的环境下,培养15‑20天,作为木霉菌二级菌种;第三步,木霉菌三级菌种的制备:取第一培养料,高温杀菌冷却后,加入2‑3%木霉菌二级菌种,然后在发酵室26‑30℃下发酵10‑15天,制成木霉菌三级菌种;第四步,木霉菌菌肥制备:取第二培养料,堆置发酵7‑15天后,将第二培养料散开自然散热,待料温度降到25‑30℃时,加入木霉菌三级菌种混匀后常温发酵,堆温度控制在26‑30℃,湿度控制在60%‑65%,每3天翻料一次,发酵10‑15天后即获得木霉菌菌肥。


说明书

一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法

技术领域

本发明属于菌肥生产技术领域,具体涉及一种木霉菌扩繁生产菌肥的方法。

背景技术

烟草黑胫病是疫霉属真菌寄生烟草致病引起的病害,在全国各地都广泛的发生,
是烟草生产上的重要病害。烟草黑胫病病菌以菌丝体和厚垣孢子在土壤或堆肥中的烟株残
余组织中越冬,病土是病害发生的最主要的初浸染源。对于该病的防治,可以用化学药剂防
治,也可以用生物防治。根据农业部“一控两减三基本”的目标,减少化学农药,减少化肥用
量,充分利用畜禽粪便、农作物秸秆的要求,对病虫害的防治提倡绿色防控,生物防治是绿
色防控的重要手段。生物菌肥、生物菌剂是最主要的生物防治的措施。生物菌剂主要是以生
物药剂的形式进行烟草病害的防治,生物药剂对烟草黑胫病的防治也有一定的效果,但是,
在防治黑胫病的效果不佳,主要原因是生物药剂以药剂的形式,它在烟防治的过程中,剂量
不够,只能在根茎部位有少量的生物菌剂,而土壤耕作层存在着大量的病原菌,生物菌剂的
剂量太少,根本不能均匀的达到土壤中,当然,土壤中的病原菌照样进行繁殖,危害烟株。所
以,生物菌防治烟草黑胫病的生物防治还是以生物菌肥的形式较好,生物菌肥在烟田整地
施肥的过程中,可以大量的随其它肥料均匀的施入烟田,并靶匀,使生物菌肥均匀的分布于
土壤耕作层(40cm)。这样,生物菌就可以均匀的、大量的杀死耕作层中的病菌。使烟株减少
了感染病菌的机会。减少了烟田黑胫病的发生。

发明内容

针对现有技术的不足,本发明提供了一种生物菌肥,本生物菌肥取材广泛,易得,
成本低廉,制作工艺简单,易推广,对烟草黑胫病的防治工作产生重要的作用。

本发明的技术方案是这样实现的:木霉菌扩繁生产菌肥的方法,包括以下步骤:

第一步,木霉菌一级菌种的培养:用PDA培养基进行木霉菌一级菌种的培养;

第二步,木霉菌二级菌种的培养:采用麦粒培养基,灭菌后接种木霉菌一级菌种,在28
℃,空气湿度为65%的环境下,培养15-20天,作为木霉菌二级菌种;

第三步,木霉菌三级菌种的制备:取第一培养料,高温杀菌冷却后,加入2-3%木霉菌二
级菌种,然后在发酵室26-30℃下发酵10-15天,制成木霉菌三级菌种;

第四步,木霉菌菌肥制备:取第二培养料,堆置发酵7-15天后,将第二培养料散开自然
散热,待料温度降到25-30℃时,加入木霉菌三级菌种混匀后常温发酵,堆温度控制在26-30
℃,湿度控制在60%-65%,每3天翻料一次,发酵10-15天后即获得木霉菌菌肥。

所述的麦粒培养基由以下质量份数的原料混合而成:小麦90份、玉米粉7份、蔗糖2
份、碳酸钙1份。

所述的第一培养料由以下质量份数的原料混合而成:玉米芯屑70份、麦麸20份、玉
米粉6份、糖0.5份、尿素0.5份、石膏粉2份、磷酸二氢钾1份,含水量为60-65%。

所述的第二培养料包括以下质量份数的原料:玉米芯屑和/或玉米杆屑80-85份、
麦麸和/或麦秆屑10-15份、生石灰2份、磷酸二氢钾1份、硫酸镁1份、尿素1份;玉米芯屑和/
或玉米秸秆屑、麦麸和/或麦秆屑混匀,撒入生石灰,磷酸二氢钾、硫酸镁、尿素制成水溶液
混入并搅拌均匀,含水量为60-65%。

所述的木霉菌一级菌种的培养中所使用的木霉菌一级菌种是从烟草根际土壤中
分离出的木霉菌。

本发明的技术方案有以下积极效果:本发明无需大型设备,操作简单,成本低廉,
工艺简单,易推广,能改善土壤质量,防治烟草病害,提高烟草产量,同时能解决农业生产中
的废料。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步的描述,以下实施例用来更加
清楚的描述本发明的技术方案,而不能以此来限定本发明的保护范围。

木霉菌扩繁生产菌肥的方法,包括以下步骤:

第一步,木霉菌一级菌种的培养:用PDA培养基进行木霉菌一级菌种的培养,该木霉菌
一级菌种是从烟草根际土壤中分离出的木霉菌;

第二步, 木霉菌二级菌种的培养:采用麦粒培养基,麦粒培养基由以下质量份数的原
料混合而成:小麦90份、玉米粉7份、蔗糖2份、碳酸钙1份;将麦粒培养基装到广口高压灭菌
瓶,用棉花塞封好,灭菌1-1.5小时,也可以用大型的土蒸锅,锅内温度100℃,灭菌时间需要
维持7-8小时,灭菌后在超净工作台或接种箱接种木霉菌一级菌种,在28℃,空气湿度为
65%,进行培养15-20天,待菌丝长满灭菌瓶,产生大量孢子,孢子含量不低于50亿CFU/g,作
为木霉菌二级菌种;

第三步,木霉菌三级菌种的制备:采用第一培养料,第一培养料由以下质量份数的原料
混合而成:玉米芯屑70份、麦麸20份、玉米粉6份、糖0.5份、尿素0.5份、石膏粉2份、磷酸二氢
钾1份;将第一培养料按比例混匀后加水湿透,原料的持水量不能过大,手抓紧料,渗出水,
但不流下来,含水量在60-65%,装入灭菌袋中,在高压灭菌锅中,121℃中灭菌2h;也可以用
大型的土蒸锅,锅内温度100℃,灭菌时间需要维持7-8小时,冷却后,在灭菌的接种箱或超
净工作台加入2-3%木霉菌二级菌种,然后在发酵室26-30℃下发酵10-15天,制成木霉菌三
级菌种;

第四步,木霉菌菌肥制备:采用第二培养料,第二培养料包括以下质量份数的原料:玉
米芯屑和/或玉米杆屑80-85份、麦麸和/或麦秆屑10-15份、生石灰2份、磷酸二氢钾1份、硫
酸镁1份、尿素0.9份;将玉米芯屑和/或玉米秸秆屑、麦麸和/或麦秆屑混合均匀,散入生石
灰,将磷酸二氢钾、硫酸镁、尿素融入水中制成水溶液,浇入原料中,搅拌均匀,第二培养料
的含水量不能过大,手抓紧料,渗出水,但不流下来,含水量在60-65%,在自然条件下堆置发
酵10-15天,发酵好的料看起来颜色变深,由于是堆积放线菌高温发酵,所以要将第二培养
料散开自然散热,待料温度降到25-30℃时,加入木霉菌三级菌种混匀后常温发酵,堆温度
控制在26-30℃,湿度60%-65%,堆积高度不能超过30-40cm,菌肥发酵堆外面盖上塑料膜,以
防弄脏或杂菌感染,经常检查温湿度,以堆...

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图1
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